目的 阐明荔枝草抗炎质量标志物,并对其含量进行测定,为荔枝草药材质量控制提供参考。方法采用高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)表征荔枝草的主要成分,根据二级质谱裂解碎片信息,并结合文献数据,进行分析鉴定。进一步通过SwissADME平台,从鉴定获得的化学成分中筛选出口服生物利用度(OralBioavailability,OB)高且符合类药五原则的活性成分;运用SwissTargetPrediction数据库查找和预测荔枝草的成分靶点;通过在线人类孟德尔遗传数据库(OnlineMendelianInheritanceinMan,OMIM)、GeneCards数据库等筛选疾病靶点。采用String11.5数据库和Cytoscape3.7.2软件构建PPI网络,并筛选核心靶点。利用DAVID6.8进行基因本体(GeneOntology,GO)注释和KEGG通路富集分析,PI3K抑制剂对富集得到的通路进行实验验证,以阐明其作用机制。对关键通路采用反向溯源分析潜在的药效物质基础,进行实验验证,并建立高效液相(HPLC)含量测定方法。结果 从荔枝草中共鉴定出36个主要成分,包括黄酮类、萜类化合物;进一步筛选出活性成分与疾病交集靶点190个;通过网络拓扑筛选获得核心靶点18个;富集分析发现荔枝草抗炎作用主要涉及的通路为NF-κBPF-6463922配制信号通路、PI3K-Akt信号通路、TNF信号通路。对NF-κB信号通路进行反向溯源得到高车前苷、高车前素、木犀草素和异鼠李素4个相关成分,分子对接发现其与PTGS2的活性位点的结合能分别为-9.5、-9.7、-9.4和-9.4 kcal/mol,均具有良好的对接活性。根据质量标志物的可测性,确定高车前苷和高车前素可作为荔枝草的抗炎质量标志物。Westbiobased compositeern Blot实验结果表明高车前苷和高车前素能显著降低COX-2和NF-κBp-p65的表达(P<0.05,P<0.01)。结论 荔枝草抗炎质量标志物为高车前苷和高车前素,可通过NF-κB通路发挥抗炎作用。