目前,肿瘤的发病率仍然呈现逐年增高趋势,已经发展成为全球最主要的威胁人类健康与生命的重大疾病。因此,肿瘤的有效治疗成为了人们广泛关注的重点。目前临床中应用的治疗手段主要包括手术治疗、放疗和化疗等。但在实际治疗过程中各种治疗手段仍然面临着各种困难,例如,手术对于点散瘤,线性瘤,以及大面积转移的局限性,放疗的风险性以及化疗的选择性差、全身毒副作用。因此,探究有效的肿瘤治疗方法仍是亟待解决的问题。然而,肿瘤细胞与周围细胞及组织存在着复杂的联系,以及肿瘤细胞自身具有免疫耐受、免疫逃逸等特点。因此,采用单一治疗手段治疗总会存在各种局限性,多手段融合治疗成为一种治疗的发展趋势。高分子载药载体的快速发展,使得纳米医药成为治疗的重要手段。纳米医药的迅速发展为肿瘤的治疗提供了新的思路。相较于单一的治疗手段,纳米医药能借助纳米平台融合多种治疗手段,弥补单一治疗的不足,更加高效地抑制肿瘤细胞。此外,纳米系统具有较高的生物安全性和生物相容性,基于高渗透滞留效应(enhancedJQ1小鼠 permeability and retention effect,EPR)能够选择性靶向肿瘤部位,为肿瘤的选择性治疗提供了条件。因此,发展多手段协同治疗纳米药物治疗肿瘤具有良好的应用前景。本研究将Fe~(3+)和表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)进行络合构建纳米载体,并通过自组装的方式负载光敏剂氯e6(photosensitizer chlorin e6,Ce6),制备了纳米药物CFNPs,用于光疗与铁死亡协同治疗肿瘤。透射电镜(transmission electron microscope,TEM)和动态光散射(dynamic light scattering,DLS)结果显示CFNPs的粒径约为130 nm,这为其通过EPR效Biogenic habitat complexity应靶向肿瘤部位提供了保障。EGCG与Fe~(3+)所形成的金属多酚网络结构能够受谷胱甘肽(L-Glutathione,GSH)或p H刺激解组装,这为纳米药物到达肿瘤部位后在肿瘤微环境刺激下释放光敏剂并执行光动力治疗提供了基础。再者,CFNPs能够在体外实验中产生单线态氧(~1O_2)和羟基自由基(·OH)显示其具有发挥光动力学治疗(Photo Dynamic Therapy,PDT)和铁死亡协同治疗的潜力。细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的荧光实验显示,CFNPs能够明显产生ROS,铁死亡抑制剂的加入,这一现象被有效抑制。细胞毒性结果显示CFNPs纳米药物能够有效杀死肿瘤细胞,通过加入铁死亡抑制剂、铁的螯合剂等能够有效逆转细胞成活率,这说明该体系能够发挥光疗与铁死亡协同治疗的效果,这也为缓解单一光动力治疗由于乏氧导致的治疗受限提供了帮助。随后对铁死亡进一步验证,谷胱甘肽过氧化物酶4(Recomselleck NMRbinant Glutathione Peroxidase 4,GPX4)的失活及脂质过氧化物(Lipid hydroperoxide,LPO)荧光成像正表达进一步表明CFNPs纳米体系能有效执行铁死亡路径。更重要的是,CFNPs纳米药物能触发免疫原性细胞死亡(Immunogenic cell death,ICD),钙网蛋白(Recombinant Calreticulin,CRT)的外排,高迁移率族蛋白B1(High Mobility Group Box 1,HMGB1)的高表达,腺嘌呤核苷三磷酸(Asymmetric Transport Protocol,ATP)的释放共同证实了这一结论。综上,本课题构建的纳米药物CFNPs在利用EPR效应选择性靶向肿瘤细胞的基础上,能联合光动力治疗及铁死亡协同治疗并触发ICD有效治疗肿瘤,这为多手段联合治疗并刺激免疫治疗提供了研究基础。