瓜蒌微丸的制备及抗大鼠急性胃溃疡作用与机制研究

目的∶基于均值化邓氏关联度计算法研究瓜蒌提取物抗氧化的物质基础,并进行抗氧化药效成分群的筛选与验证。基于抗氧化药效成分群测定瓜蒌提取物中总黄酮的含量。制备瓜蒌微丸,并建立其质量标准。建立无水乙醇致急性胃溃疡大鼠模型,研究瓜蒌微丸抗大鼠急性胃溃疡作用并探讨其作用机制,通过邓氏关联度计算法构建瓜蒌微丸HPLC指纹图谱与抗大鼠急性胃溃疡药效间的谱效关系。基于网络药理学-分子对接技术分析瓜蒌微丸中五种黄酮类成分在抗胃溃疡中发挥作用的机制。方法∶1)采用HPLC法建立瓜蒌提取物的指纹图谱,测定瓜蒌提取物(27、9、3 mg·m L~(-1))对DPPH自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除率,采用均值化邓氏关联度计算法研究瓜蒌提取物抗氧化的谱效关系并筛选抗氧化药效成分群。按瓜蒌提取物抗氧化药效成分群中已知成分的含量制备混合对照品溶液并测定DPPH·、O_2~-·清除率。2)以芦丁、木犀草素、芹菜素、异槲皮苷、山奈酚5种单体化合物按1∶2∶1∶2∶3(质量比)混合制备瓜蒌提取物的抗氧化药效成分群。采用紫外-可见分光光度法,以抗氧化药效成分群建立标准曲线并测定瓜蒌提取物中Semi-selective medium总黄酮的含量。3)利用挤出滚圆法制备瓜蒌微丸,在单因素试验基础上,以圆整度、Hausner比(Hausner RdiABZI STING agonistatio,HR)、脆碎度与收率作为考察指标,以载药量、滚圆时间、滚圆频率为考察因素,采用Box-获悉更多Behnken响应面优化制备工艺。以总黄酮累积释放度为指标,考察瓜蒌微丸的体外溶出度,并建立其质量标准。4)采用无水乙醇灌胃法建立急性胃溃疡大鼠模型,以溃疡面积占比为指标,评价瓜蒌微丸对大鼠急性胃溃疡的保护作用,观察胃组织病理学改变,测定胃酸的p H及体积,检测大鼠血清及胃组织中各药效学指标,采用灰色关联度法研究瓜蒌微丸抗胃溃疡的谱效关系。5)基于网络药理学与分子对接技术研究瓜蒌微丸中五种黄酮类成分在抗大鼠急性胃溃疡中发挥作用的机制。通过查阅文献,利用数据库筛选出五种(芦丁、木犀草素、芹菜素、异槲皮苷、山奈酚)黄酮类成分的靶点蛋白、胃溃疡及抗氧化的靶点蛋白,基于三者的共同靶点,得到蛋白互作网络(PPI)。运用SYMBL软件,将PPI网络中度值排名前20个核心靶点与其对应的活性成分进行分子对接,并以Total Score≥5为指标,分析瓜蒌微丸中五种黄酮类成分在抗胃溃疡中发挥作用的机制。结果∶1)瓜蒌提取物HPLC指纹图谱中36个共有峰与…