研究目的:颞下颌关节骨关节炎(Temporomandibular joint osteoarthritis,TMJ OA)是颞下颌关节的常见疾病,主要病理表现为关节软骨进行性退变及软骨下骨改变。临床上常引起颞下颌关节区疼痛、关节杂音、下颌运动障碍,甚至导致颜面部畸形,给患者造成极大的生理及心理压力,严重影响患者的生活质量。然而迄今为止,TMJ OA的病理特征及其分子机制尚不清楚,更缺乏有效的手段干预MRTX1133价格TMJ OA的疾病进程。骨性Ⅱ类错（牙合）畸形多数伴有后牙咬合支持高度降低,及下颌骨逆旋,从而导致关节受压及TMJ OA的发生。颞下颌关节的功能运动和生物机械力与咬合高度关系相当密切,而咬合高度降低被认为是TMJ OA的潜在发病因素。目前认为,细胞炎症因子在骨关节炎(Osteoarthritis,OA)的病理过程中扮演着重要角色。其中,前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE2)由多种细胞分泌,一直以来被认为是参与OA和类风湿关节炎的主要炎症因子。近年来,TMJ OA中骨破坏的研究多数聚焦于骨髓腔内外周血来源的单核巨噬细胞系统的破骨细胞分化,忽视了外源性破骨细胞在其中的重要作用。在OA发生、发展过程中,PGE2起着非常重要的作用,包括造成胶原合成减少,软骨细胞凋亡,基质金属蛋白酶合成增加,促血管生成因子合成增加,血管内皮细胞增殖增加、凋亡减少等。其中PGE2在TMJ OA中调控破骨细胞分化的机制研究尚无文献报道!本研究拟探讨在咬合高度降低诱发TMJ OA的条件下,炎症因子PGE2促进滑膜内破骨前体细胞向破骨分化的信号通路,并探索炎性因子PGE2调控破骨分化的深层分子机理,阐明咬合支持丧失致TMJ OA的机理,并为临床治疗TMJ OA提供理论依据和治疗新思路。研究方法:在本研究,拟从咬合垂直距离降低入手,建立大鼠TMJ OA模型。首先,通过Micro-CT、组织形态学观察以及免疫组化、免疫荧光等方法研究大鼠TMJ OA模型中的颞下颌关节髁突及软骨下骨的破坏以及PGE2在TMJ OA中的表达与定位。其次,体外实验通过Western Blot、PCR、TRAP染色等,进一步探究炎性微环境下PGE2-EP4/p38 MAPK/CREB轴调控破骨细胞分化的深层机制,旨在确定炎性微环境下PGE2对滑膜中诱导破骨前体细胞破骨分化的调控作用,深入探讨TMJ OA的发生、发展机制。研究结果:1.Micro-CT结果显示:实验组大鼠髁突BV/TV、BS/BV、Tb.N、BMD减小;Tb.Sp、Tb.Th升高,且均在第6周差异最明显。Mankin组织学评分显示:随着大鼠后牙咬合高度降低时间的增加,病理评分逐渐升高,第6周达到最大值。2.免疫组织化学染色显示:MMP9、RANKL、TRAP、COX2随着建模时间的增加,其表达升高,在第6周表达最明显。免疫荧光化学染色显示:实验组PGE2表local immunotherapy达主要集中在关节盘后带附近的滑膜组织中。且在第6周表达最明显。3.CCK-8细胞毒性实验结果显示:50μM、100μM PGE2可促进RAW264.7细胞增殖。Western-blot及q RT-PCR结果显示:50μM、100μM PGE2的加入可上调破骨分化标志基因(CTR、RANK、CTSK)及TRAP的蛋白及m RNA表达水平,100μM PGE2对破骨细胞分化NVP-TNKS656体内实验剂量标志基因及TRAP的蛋白及m RNA表达水平的促进作用最为显著。4.TRAP染色结果提示:100μM PGE2能显著增加破骨诱导剂诱导的TRAP阳性多核细胞的形成,促进破骨细胞分化。5.体外实验中,Western-blot及q RT-PCR结果显示:加入100μM PGE2后EP4m RNA及蛋白表达量随时间的推移逐渐升高,且2小时达到最高。6.体外实验中,Western-blot结果显示:破骨分化过程中加入PGE2后,EP4受体、p38 MAPK、p-p38 MAPK、CREB、p-CREB蛋白表达量增加;加入EP4抑制剂后,EP4受体、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达量均降低;加入p38 MAPK抑制剂后,p-p38 MAPK、p-CREB蛋白表达显著降低。研究结论:1.大鼠咬合高度降低模型构建成功,且咬合垂直高度降低可致TMJ OA的发生。2.PGE2在TMJ髁突及滑膜组织内表达均增高,PGE2在软骨下骨和滑膜组织诱发的骨破坏中均发挥重要作用。3.100μM PGE2可诱导破骨前体细胞向破骨细胞分化。4.PGE2可通过EP4/p38 MAPK/CERB轴调控破骨前体细胞的破骨分化过程,参与髁突表面软骨及软骨下骨的破坏。