目的:结直肠癌在临床肿瘤中的发病率一直居高不下。目前手术联合局部放疗、全身化疗是治疗结直肠癌的主要治疗方案。尽管放射治疗技术已有所进步,但放射治疗抗性的存在,仍是导致恶性肿瘤患者的转移、复发、放疗失败和预后不良的重要原因。因此,增加放疗敏感性是重要的挑战。溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶-1(Lysophosphatidylcholine acyltransferase 1,LPCAT1)是磷脂代谢途径中此网站的重要酶类物质,在结直肠肿瘤细胞中呈高表达。本研究通过敲低结直肠癌细胞株中LPCAT1基因表达,检测敲低LPCAT1与联合放疗对细胞增殖能力的影响,进而探讨LPCAT1在结直肠癌放疗中的作用及意义。方法:培养结直肠癌细胞SW620、SW480、HCT116,通过聚合酶链式反应(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)及Western-blot检测三株细胞中LPCAT1的表达,从中筛选出LPCAT1表达水平较高的结直肠癌细胞系。通过慢病毒转染技术敲低细胞内LPCAT1表达,获得稳定转染的敲低组细胞及阴性对照组细胞。将敲低组及阴性对照组细胞给予6Gy放射线照射处理,获得并设置阴性对照联合放疗组及敲低联合放疗组。采用CCK-8实验检测阴性对照组、敲低组、阴性对照联合放疗组、敲低联合放疗组四组的细胞活率,克隆形成实验进一步检测四组细胞的增殖能力变化并绘制细胞存活曲线。随后采用RT-PCR及Western-blot检测敲低联合放疗组及阴性对照联合放疗组细胞内LPCY-27632细胞培养AT1的相对表达量,以明确在放疗作用后细胞内LPCAT1的表达是否存在变化。为进一步探究敲低LPCAT1联合放疗对结直肠癌细胞放疗敏感性的影响及具体机制,分别收集阴性对照组、敲低组、阴性对照联合放疗组、敲低联合放疗组细胞蛋白样本行蛋白质组学检测及生物信息学分析,筛选与结直肠癌发生发展相关的蛋白,在体外实验中采用RT-PCR进一步验证。所得实验结果数据应用统计软件SPSS 23.0行统计与分析处理,两组间计量资料采用t检验human‐mediated hybridization,多组间比较采用方差分析。结果:1.在结直肠细胞HCT116中LPCAT1的m RNA及蛋白相对含量较高。通过慢病毒转染技术可下调HCT116细胞内LPCAT1的表达,成功构建敲低LPCAT1表达的结直肠癌细胞系。2.与阴性对照组细胞相比,敲低组细胞活率下降,克隆集落减小,增殖能力降低。在敲低LPCAT1联合放疗的作用下,细胞的增殖能力进一步下降(P<0.05)。3.通过检测放疗后细胞内LPCAT1的含量,发现阴性对照组细胞经放射线照射后,LPCAT1的m RNA及蛋白含量下降(P<0.01)。敲低联合放疗组细胞中LPCAT1表达水平进一步减低(P<0.0001)。4.蛋白组学技术分析各组细胞内差异蛋白,将差异表达蛋白进行KEGG功能分类及功能富集分析,筛选出CCNB1作为差异下调关键蛋白。进一步通过RT-PCR验证发现,与阴性对照组相比,阴性对照联合放疗组、敲低联合放疗组细胞内CCNB1的m RNA相对表达量下降(P<0.0001);敲低联合放疗组细胞内CCNB1的m RNA表达量显著低于阴性对照联合放疗组(P<0.01)。结论:1.敲低LPCAT1可抑制HCT116细胞的增殖能力,敲低LPCAT1联合放疗可进一步降低细胞的增殖能力。2.给予结直肠癌细胞行放疗后,可降低细胞内LPCAT1的表达水平。3.敲低LPCAT1后可能通过抑制CCNB1表达而增加结直肠癌细胞的放射敏感性。LPCAT1可能是调控结直肠癌放疗敏感性的潜在靶点。