目的 探索无血清悬浮(SFMoil biodegradation)MDCK细胞技术培养不同基因型流感病毒的最佳培养条件。方法 以SFM-MDCK细胞以及有血清培养基(FBSFer-1试剂)-MDCK细胞为介质，比较两种技术的稳定性以及阳性培养率。对不同基因型流感病毒的培养条件进行优化，确定最佳培养温度、pH值、TPCK胰酶添加浓度及作用时间。结果 MDCK细胞在SFM中的生长状态优于FBS,在第3至4天MDCK细胞生长最旺盛，活细胞比率最高。H1N1、H3型流感病毒在34℃、35℃培养时获得的病毒血凝滴度较高，BV、BY型流感病毒在34℃培养时获得的病毒血凝滴度较高。当TPCK-胰酶浓度为10、20μg/ml时获得的H1N1、H3、BV、BY型流感病毒血凝INCB018424滴度较高。吸附时间为1.5、2 h时获得的BY型流感病毒血凝滴度较高，吸附时间为1、1.5、2h时获得的H1N1、H3型流感病毒血凝滴度较高。SFM的阳性率为91.23%(104/114),高于FBS的79.82%(91/114),差异有统计学意义(χ~2=9.327,P=0.014)。FBS与SFM培养各亚型流感病毒的血凝滴度比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 SFM分离病毒的阳性率和血凝滴度均高于FBS,应针对不同流感病毒亚型建立实验室最佳培养条件，得到更高载量的病毒样本。