目的:探讨内皮祖细胞微囊泡(endothelial progenitor cells microvesicles,EPC-MVs)中的miR-98-5p参与血管紧张素Ⅱ(Angiotensin II,AngⅡ)诱导的原代大鼠肾细胞(primary rat kidney cells,PRKs)损伤修复机制。方法:选取12只8周龄WKY雄性大鼠,饲养2周后处理,将大鼠肾皮质切片分离后,采用密度梯度离心法分离PRKs,并采用IF进行鉴定。处理大鼠股骨和胫骨,分离EPCs,通过Dil-Ac-LDL染色鉴定。用AngⅡ处理PRKs,建立PRK肾损伤模型,用于体外模拟高血压肾病。分离上清液,进一步提取MVs,并用PKH26标记EPC-MVs。将PRKs、AngⅡ、EPCs、EPC-Medium、EPC-MVs构成共培养系统并分组,用Rt-q PCR分析测定miR-98-5p、IGF1R的表达水平。将miR-98-5p mimic、miR-98-5p inhibitor、miR-98-5p mimic NC、miR-98-5p inhibitor NC转染至EPCs,ov-IGF1R质粒、ov-NC质粒转染到PRKs中,分离上清液,进一步提取MVs。将转染后的EPC-MVs、PRKs加入共培养系统,并分组用于后续实验。使用高通量基因表达数据分析糖尿病大鼠与正常大鼠之间的差异表达基因,并参考京都基因和基因组百科全书分析这些差异表达基因所涉及的信号通路。双荧光素酶试验用于检测miR-98-5p与靶基因的结合。采用CCK-8、FCM、ELISA、Western blot方法分析EPC-MVs通过调节miR-98-5p/靶基因轴及PI3K/Akt/e NOS信号通路对AngⅡ诱导的PRKs细胞活力、产生的氧化应激(ROS、MDA、GSH、SOD)及炎症反应(IL-6、IL-1β和TNF-α)表达水平的影响。所有实验均重复3次。结果:在荧光显微镜下显示,波形蛋白/α-SMA在PRKs中的高表达(IF),提示PRKs的分离成功。高表达的红色荧光(Dil-Ac-LDL染色)和蓝色荧光(DAPI核染色)的叠加,提示EPCs分离成功。在PRKs的细胞质中检测到PKH26荧光,表明EPC-MVs已与PRKs融合。Rt-q PCR分析结果表明,与对照组相比,EPC-MVs组逆转了AngⅡ诱导的miR-98-5p表达下调、IGF1R表达上调(P<0.05)。双荧光素酶测定分析、Rt-q PCR分析证明miR-98-5p靶向调控IGF1R。CCK-8、FCM及ELISA分析结果表明,用Ang II处理PRKs会细胞活力下降,氧化应激(升高ROS和MDA水平,降低GSH和SOD水平)和炎症反应(升高IL-1β,IL-6和TNF-α水平)。但EPC-MVs可缓解Ang II诱导的PRKs损伤。与对照组相比,miR-98-5p mimic-MVs组保护PRKs免受AngⅡ诱Semi-selective medium导的细胞活力下降、氧化应激diABZI STING agonist MW和炎症反应(P<0.05),并增强了EPC-MVs的作用。而miR-98-5p inhibitor-MVs组结果与miR-98-5p mimic-MVs组结果相反(P<0.05)。Western blot、CCK-8、FCM及ELISA分析结果表明,与AngⅡ组比较,miR-98-5p mimic-MVs组促进PI3K/Ak此网站t/e NOS的磷酸化(P<0.05),并保护PRKs免受AngⅡ诱导的细胞活力下降、氧化应激和炎症反应(P<0.05),而与对照组相比,miR-98-5p mimic-MVs+ov-IGF1R组则逆转了miR-98-5p mimic-MVs的作用(P<0.05)。结论:携带高表达miR-98-5p的EPC-MVs可通过下调IGF1R,促进信号通路PI3K/Akt/e NOS的磷酸化,从而保护PRKs免受AngⅡ诱导的细胞活力下降、氧化应激和炎症反应。为高血压肾病的治疗提供新的靶点。