目的:益元化腐汤以彝医理论“腐肠理论、元气”为理论指导而组成的方药,临床常用于溃疡性结肠炎、肛肠疾病等病症,具有较好的临床疗效。本课题研究彝药益元化腐汤调控T细胞亚群介导治疗溃疡性结肠炎的效应机制,为益元化腐汤临床应用治疗溃疡性结肠炎提供科学基础,传承与创新彝族医药。方法:1、构建细菌脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞株Raw264.7炎症细胞模型,MTT法检测益元化腐汤此网站浸膏对炎症细胞细胞毒性作用;采用Griss方法检测益元化腐汤浸膏对炎症细胞模型NO产生的影响。2、将32只C57BL/6健康雌性小鼠按照体质量的不同,随机分为4组:正常组、模型组、益元化腐汤低剂量(4.05g·kg~(-1))和高剂量组(8.1g·kg~(-1)),每组8只。除正常组,其余用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导建立小鼠溃疡性结肠炎模型,自由饮水,每2d更换一次饮用水,持续造模8d;自饮用DSS第1天起,各组按相应剂量灌胃给药,每日1次,连续8d。予以益元化腐汤浸膏治疗,观察小鼠的大便、活动、体重,采用疾病活动指数(Diseases activity index,DAI)评价溃疡性结肠炎症状,苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin staining,H&E)观察结肠组织形态学变化;荧光定量PCR(q PCR)检测脾、肠系膜淋巴结淋巴细胞T细胞亚群(IL-17A、RORγt、IFN-γ、Foxp3)的相对表达SCH772984 molecular weight水平;流式细胞术(flow cytometry)检测脾脏和淋巴结表面标志(CD4~+、CD3~+、CD44~+、Ki67~+、B220~+)和胞内Th1细胞(IFN-γ~((10))CD4~+T细胞)、Th17细胞(IL-17~((10))CD4~+T细胞)和调节性T细胞(CD4~+Foxp3~+T细胞)的表达水平。结果:1、益元化腐汤对Raw264.7细胞活性的影响以及对NO释放的抑制作用益元化腐汤125μg/ml、250μg/ml、500μg/ml剂量组显著抑制NO的产生(P<0.05或P<0.01),其IC_(50)为202.6μg/ml,CC_(50)大于500μg/ml。2、益元化腐汤对溃疡性结肠炎模型小鼠疾病活动指数的影响和模型组对比,益元化腐汤4.05g·kg~(-1)和8.1g·kg~(-1)剂量组小鼠体质量、结肠长度和结肠质量明显升高,DAI评分明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。3、益元化腐汤对溃疡性结肠炎小鼠结肠组织病理损伤程度的影响模型组结肠组织表现为大片黏膜层缺失、脱落,弥漫性炎性细胞浸润;益元化腐汤4.05g·kg~(-1)和8.1g·kg~(-1)剂量组较模型组结肠组织的炎性细胞浸润和黏膜层缺损减小,肠黏膜溃疡减轻。4、益元化腐汤对溃疡性结肠炎模型小鼠淋巴T细胞亚群的影响(1)表面标志流式细胞术检测结果显示,益元化腐汤药物干预后对,8.1g·kg~(-1)剂量组显著下调脾脏淋巴细胞γδTCR表达(P<0.05),而益元化腐汤对脾、肠系膜淋巴结CD4~+、CD3~+、CD44~+、Ki67~+、B220~+比例和绝对数量无明显的影响。(2)胞内染色流式细胞术检测结果显示,与模型组相比,益元化腐汤4.05g·kg~(-1)和8.1g·kg~(-1)剂量治疗后,抑制Th1细胞(CD4~+IFN-γ~+T细胞)、Th17细胞(CD4~+IL-17~+T细胞)绝对数量和比例(P<0.05或P<0.01),然而对Treg细胞(CD4~+Foxp3~+调节性T)表达无明显影响。5、益元化腐汤对溃疡性结肠炎模型T细胞亚群相关因子mRNA表达的影响qPCR检测结果显示,与模型组比较,益元化腐汤8.1g·kg~(-1)剂量组对肠系膜淋巴结Th17细胞RORγτm RNA表达显著下调,差异有显著统计学意义(P<0.05或P<0.01);对于脾脏,益元化腐汤8.1g·kg~(-1)剂量组显著下调UC小鼠Th17细胞因子IL-17A和转录因子RORγt m RNA表达(P<0.05)。结论:益元化腐汤能够改善溃疡性结肠炎模型小鼠的体质量、结肠质量、结肠长度及病理学评分等一般情况,还能显著下调γδTCR表达以imported traditional Chinese medicine及Th17细胞因子IL-17A和转录因子RORγt m RNA表达,且抑制Th1细胞(CD4~+IFN-γ~+T细胞)、Th17细胞(CD4~+IL-17~+T细胞)绝对数量和比例,从而抑制Th17细胞诱导的炎症反应介导治疗溃疡性结肠炎。发挥彝医药治疗溃疡性结肠炎的优势,为治疗溃疡性结肠炎提供对方面、多角度临床需要,可供研究溃疡性结肠炎方面的工作者所借鉴。