婴儿配方乳粉中食源性致病菌双重ERA快速检测方法的建立

为快速多重筛查婴儿配方乳粉中食源性致病菌的污染情况，建立克罗诺杆菌、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌及金黄色葡萄球菌双重酶促等温扩增（Enzymatic Recombinase Amplification，ERA）快速检测方法。首先，通过筛选确定了对4种食源性致病菌特异性好、扩增效率高的引物探针。经过优化建立了两组双重ERA检测体系可快速筛查4种食源性致病菌。该方法对沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌及金黄色葡萄球菌的最低检出限均为10~(-2 )ng/μL；对克罗诺杆菌的最低检出限为1 ng/μL。模拟污染实验显示，污染量为1 CFU/mLCobimetinib的样品增菌培养6 h后，可检出4种致病菌。应用该方法对市售婴儿配方乳粉样品进行检测，检测结果与行业标准规定的实时荧光PCR法一致，证实了本研究建立的双重ERA检测方法的准确性和可靠性。采用本方法仅需20 mmedical trainingin左右即可一次性检出4种致病菌，相较于传统的“金标准”方法以及实时荧光PCR法显著提高了检测效率，对于推进食源性致MK-4827使用方法病菌的快速筛查具有重要意义。