目的：检测天冬酰胺合成酶（ASNS）在胆管癌（CCA）中的表达情况，探讨ASNS在CCA转移中的作用及其机制。方法：通过公共数据库分析各肿瘤组织中ASNS的mRNA表达；收集CCA患者病理组织（n=27），构建硫代乙酰胺诱导的大鼠自发CCA模型和左中位胆管结扎联合二乙基亚硝胺诱导的小鼠自发CCA模型，通过免疫组化、Western blot和免疫荧光法检测ASAZD1152-HQPA作用NS蛋白表达。采用CCK8、划痕和Transwell实验检测ASNS对人CCA细胞HuCCT1和HCCC-9810增殖、迁移和侵袭的影响。构建RSL3供应商ASNS稳定敲减的CCA细胞株HuCCT1~(shNC)、HuCCT1~(shASNS)、HCCC-9810~(shNC)和HCCC-9810~(shASNS)，通过肝原位种植和尾静脉注射研究ASNS对CCA细胞肝内生长和肺转移的影响。利用公共数据库富集与ASNS相关的信号通路，并用免疫荧光和Western blot验证相关分子机制。结果：无论在人或动物CCA组织中，ASNS表达水平均高于癌旁组织（P<0.01）。ASNS以酶活性非依赖性方式促进CCA细胞HuCCT1和HCCC-9810的增殖、迁移与侵袭。生物信息学分析显示，β-catenin在ASNSTB and other respiratory infections高表达的CCA组织中富集，ASNS通过促进β-catenin核转位，启动CCA细胞上皮-间充质转化（EMT）。β-catenin抑制剂XAV-939可显著抑制CCA细胞的侵袭与迁移。结论：ASNS在CCA中高表达，通过促进β-catenin核转位，介导EMT，驱动CCA转移。