近年来随环境气候的变化,设施大棚温度超过40℃。高温胁迫(HTS)已成为设施蔬菜生长的主要限制因子。不结球白菜(Brassica rapa L.ssp.chinensis)是我国菜篮子工程的重要绿叶类蔬菜。不结球白菜性喜冷凉,当温度过高时会影响不结球白菜的产量和品质。过氧化氢(H_2O_2)是植物体内植物活性氧(ROS)代谢通路的信号分子,广泛参与植物的生命活动和逆境响应,在ROS代谢通路中起着重要作用。当热敏型不结球白菜受到HTS,ROS积累导致氧化损伤。通过H_2O_2处理探究缓解不结球白菜氧化损伤的途径并分析其作用机理具有重要意义。本研究以不结球白菜热敏型品种‘金品寒春’和耐热型品种‘金品1夏’为试验材料,38°C HTS,H_2O_2(0、0.1、0.5、1和10 mmol/L)处理,研究不结球白菜不同耐热型品种的生理响应,分析‘金品寒春’叶片ROS代谢变化;通过不结球白菜基因组数据库挖掘ROS调控基因Rboh家族,进行基因家族生物信息学分析,揭示不结球白菜Rboh基因热响应调控机理,为耐热性状的遗传改良和设施栽培管理提供理论依据。主要结果如下:1、HTS对不结球白菜不同品种生理特性的影响高温处理12 h,不结球白菜的H_2O_2含量、脯氨酸含量、可溶性糖含量、CAT和SOD活性都显著升高,均以耐热型品种活性较高。相对含水量均显著下降;热敏型品种‘金品寒春’MDA含量、相对电导率显著升高,可溶性蛋白含量、POD活性无显著变化;相比于热敏型品种,耐热型品种‘金品1夏’MDA含量、相对电导率变化不明显,可溶性蛋白含量、POD活性显著下降。高温处理12 h,热敏型品种叶片叶绿素a含量显著下降,耐热型品种无显著性变化。类胡萝卜素均呈上升趋势,耐热型品种上升趋势大于热敏型品种;实际光化学效率和电子传递速率均呈上升趋势,热敏型品种均大于耐热型品种。最大光化学效率均呈下降趋势,热敏型品种下降趋势大于耐热型品种。推测HTS破坏热敏型品种叶片表皮细胞形态,细胞膜的损伤加剧。耐热型品种渗透调节能力和抗氧化能力较高,有效缓解短期高温氧化损伤。2、外源H_2O_2处理‘金品寒春’叶片的此网站ROS代谢分析喷施H_2O_2处理后,HTS 12 h,随H_2O_2浓度的增加,POD、APX和MDHAR活性呈升高趋势,CAT活性呈下降趋势。而MDA和H_2O_2含量呈先下降后升高的趋势,ASA含量迅速升高后保持稳定,而SOD、GR、TPX、DHAR活性,GSH和GSSG含量呈迅速升高PD0325901说明书后下降的趋势。其中外施浓度0.1 mmol/L H_2O_2处理降低叶片MDA和H_2O_2含量;提高叶片中坏血酸谷胱甘肽循环SOD、POD、APX、MDHAR、DHAR、GR和TPX酶活性,增加叶片ASA、GSH和GSSG含量。推测浓度为0.1 mmol/L H_2O_2提高坏血酸谷胱甘肽循环的酶活性和物质Drug Discovery and Development的含量,降低MDA和H_2O_2含量缓解高温对‘金品寒春’的伤害。3、不结球白菜Rboh基因家族生物学信息分析呼吸爆发氧化酶(Rboh)是参与ROS产生的关键酶,在植物的各种生物和非生物胁迫中起重要作用。根据不结球白菜基因组鉴定出15个Rboh基因(BcRboh A-BcRboh O)。14个BcRboh蛋白被预测定位在细胞膜表达,1个在细胞核表达;BcRboh包含3个保守结构域,一个EF-hand结构域和一个跨膜区域;系统发育分析表明,BcRboh分为4个亚族,表明潜在的不同功能和进化;利用Plant CARE软件预测顺式作用元件,结果表明主要包括响应植物生长发育、响应逆境胁迫、光和植物激素4类;对15个成员的相对表达量进行测定,结果显示,在0.1 mmol/L的H_2O_2处理后,不结球白菜叶片BcRboh K基因表达上调。8个基因表达水平下调,其余基因无显著性变化;对表达显著的BcRboh K进行载体构建。在烟草和洋葱中观察得到BcRboh K均在细胞膜中表达。