基于VIGS技术的无花果FcMYB114基因功能研究

【目的】无花果紫皮品种相比于青皮品种,具有外观品质好、保健价值高、商品价值高等优势,是目前无花果育种的主要方向。对调控无花果果皮颜色的相关基因进行功能性研究对于选育不同皮色的无花果品种具有重要意义。【方法】以‘紫宝’无花果为试材,利用同源克隆技术对‘紫宝’无花果果皮类黄酮生物合成调控基因FcMYB114的保守域进行克隆,通过VIGS(Virus induced gene silencing)技术将FcMYB114基因进行沉默,并对其功能进行研究。【结果】基因定量表达分析显示,FcMYB114基因在‘紫宝’幼果期果皮(PY)中表达量最少,在成熟期果皮(PM)中表达量最高,通过遮光处理后FcMYB114基因的表达量显著降低;系统进化树表明,无花果FcMYB114(c42269_g1)与红皮梨PyMYB114的亲缘关系最近,序列相似性高达83.12%,与拟南芥中AtMYB114、碧桃中PBrazillian biodiversitypMYB9亲缘关系较近;多重序列比对分析结果显示,FcMYB114在序列N端具有高度同源的R2-R3 DNA结合结构域,与大多数MYB转录因子的结构相似;经VIGS沉默处理的无花果果实与对照相比,在果皮色泽上存在明显差异,花色苷含量约为对照的38.5%;RT-qPCR分析表明类黄酮生物合成代谢途径相关结构基因在FcMYB114基因沉默处理后其表达量发生改变,其中FcDFR、FcANS和FcUFGT表达量呈显著下调趋势。【结论】在pTRV2-FcMYB114介导的无花果果皮中,GW-572016分子式花青素含量降低,类黄酮生物合成代谢途径结构基因表达量显著下调,表明FcMYB114基因可Berzosertib分子式能正向调控无花果果皮花青素合成,为无花果类黄酮生物合成途径中相关转录因子的分子调控机理解析提供了新的见解,为创制不同色泽的无花果品种奠定理论基础。