研究目的:经皮冠状动脉介入术后支架内再狭窄仍是临床亟待解决的重点问题,炎症反应是其核心机制之一。本课题组前期研究发现“毒瘀互结”理论与炎症反应关系密切,此次研究是将基于毒瘀互结理论的解毒活血方运用于血管内再狭窄的机制研究,通过球囊损伤大鼠血管建立胸主动脉内膜增生模型,探究解毒活血方在Toll样受体4/核转录因子-κB信号通路中的作用机制,明确解毒活血方在血管再狭窄中的机理作用。研究方法:选取72只8周龄(250—300g)雄性SPF级SD大鼠,随机分为6组,每组12只,分别是假手术组、模型组、解毒活血方低剂量组、解毒活血方中剂量组、解毒活血方高剂量组Baf-A1抑制剂、阿司匹林组。按照课题组既往方法建立大鼠胸主动脉内膜增生模型,造模后根据设计方案分别灌服蒸馏水,不同剂量解毒活血方,阿司匹林药物,灌胃结束后分批次解剖取材。Masson染色观察胸主动脉内膜;ELISA法检测血清中ICAM-1和VCAM-1浓度;Western blot检测血管组织中PCNA、TLR4、IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB的蛋白表达。研究结果:1.胸主动脉Masson染色结果:假手术组血管内膜平整,纤维分布有序;模型组内膜增生明显,中层增厚,胶原纤维和平滑肌含量都大幅增加,纤维排序杂乱,部分可见炎症因子和脂质沉积。解毒活血方组和阿司匹林组,内膜以及中膜均有不同程度的增厚,但较模型组相比,胶原纤维以及平滑肌含量存有不同程度的下降。2.血清中ICAM-1、VCAM-1的比较:造模后不同时期内,M组的ICAM-1和VCAM-1浓度显著高于S组(P<0.01);JL、JM组的ICAM-1和VCAM-1浓度相较于M组无显著性差异变化(P>0.05),而JH组与A组的ICAM-1和VCAM-1浓度显著低于M组(P<0.01)。与A组相比较,造模后JH组的ICAM-1和VCAM-1浓度均无显著性差异变化(P>0.05)。造模后14天,JL、JM组的ICAM-1浓度较A组均无显著变化(P>0.05),而VCAM-1较A组升高(P<0.05);造模后28天JL组的ICAM-1和VCAM-1浓度均较A组升高(P<0.05),但JM组的ICAM-1和VCAM-1浓度无显著性差异变化(P>0.05)。3.血管组织中PCNA蛋白表达比较:造模后各个时期内,M组的PCNA蛋白表达显著高于S组(P<0.01);JL组和JM组的PCNA蛋白表达相较于M组均无显著性差异变化(P>0.05),而JH组和A组的PCNA蛋白表达显著低于M组(P<0.01)。与A组相比较,JL组PCNA蛋白表达显著高于A组(P<0.01),而JH组的PCNA蛋白表达相较于A组无显著性差异变化(P>0.05)。造模后14天JM组的PCNA蛋白表达显著高于A组(P<0.01),而造模后28天JM组的PCNA蛋白表达相较于A组无显著性差异变化(P>0.05)。4.血管组织中TLR4/NF-κB蛋白表达比较:造模后14天,M组TLR4、IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB蛋白表达均显著高于S组(P<0.01);JL、JM组TLR4、IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB蛋白较M组均无显著性差异变化(P>0.05),JH组和A组TLR4、IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB蛋白表达较M组有不同程度的下降(P<0.05,P<0.01);JL组IKK蛋白表达高于A组(P<0.01),JM、JH组的IKK蛋白表达oncology and research nurse以及JL、JM、JH组的TLR4、P-IκBα/IκBα、NF-κB蛋白表达较A组均无显著性差异变化(P>0.05)。造模后28天,M组TLR4、IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB蛋白表达均显著高于S组(P<0.01);JL组TLR4、IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB以及JM组TLR4、NF-κB蛋白表达较M组均无显著性差异变化(P>0.05),JM组IKK、P-IκBα/IκBα蛋白表达以及JH、A组TLR4、IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB蛋白表达均有不同程度降低(P<0.selleck化学05,P<0.01);JL组IKK、P-IκBα/IκBα蛋白表达高于A组(P<0.05,P<0.01),JM、JH组的IKK、P-IκBα/IκBα蛋白表达以及JL、JM、JH组的TLR4、NF-κB蛋白表达较A组均无显著性差异变化(P>0.05)。研究结论:1.解毒活血方可以降低内膜增生模型大鼠血管中的胶原纤维和平滑肌含量,从而减少平滑肌细胞增殖,进而防止内膜增生。2.解毒活血方可以通过降低内膜增生模型血清中ICAM-1和VCAM-1的浓度,减轻炎症反应,减少细胞黏附。3.解毒活血方可以通过降低内膜增生模型大鼠血管组织中的PCNA蛋白表达,抑制血管平滑肌增殖。4.解毒活血方可以通过降低受体TLR4的蛋白表达,从而降低下游IKK、P-IκBα/IκBα、NF-κB的蛋白表达,抑制TLR4/NF-κB信号通路的激活与传导,阻断NF-κB进入细胞核产生炎症反应。5.解毒活血方可以通过降低内膜增生模型大鼠中的炎症表达,进而减少血管平滑肌细胞增殖,抑制新生内膜形成,从而抑制内膜增生,最终防止再狭窄。