目的:研究芪龙胶囊在不同时间点干预对急性期脑出血大鼠的作用,并确定最佳用药时间。在此基础上,研究芪龙胶囊是否可通过抑制P2X7R/NLRP3-IL-1β信号通路发挥抗炎作用,从而改善脑出血大鼠的预后,为临床治疗提供新的思路。方法:1、SPF级雄性SD大鼠(300g±20)随机分为假手术组、模型组、预给药组、6h给药组、24h给药组。假手术组大鼠纹状体注射生理盐水,其余各组注射胶原酶Ⅳ构建脑出血模型。造模前,预给药组给予芪龙胶囊250mg/kg灌胃7d,其余各组给予生理盐水灌胃7d。造模后,假手术组和模型组给予生理盐水灌胃,预给药组和6h给药组在造模6h后予芪龙胶囊250mg/kg灌胃,24h给药组在造模24h后予芪龙胶囊250mg/kg灌胃,每组大鼠均每隔24h给药一次,共3d,每日一次。采用改良的神经功能缺损评分(m NSS)检测各组大鼠造模后1d、3d的神经功能缺损情况对大鼠行为学进行记录和评估,检测大鼠体质量的改变,采用干湿重法检测大鼠脑含水量变化,对脑组织切片使用Image J计算脑出血体积。2、SPF级雄性SD大鼠(300g±20)随机分为假手术组、模型组、阳性药组、芪龙胶囊高剂量组、芪龙胶囊中剂量组、芪龙胶囊低剂量组。假手术组大鼠纹状体注射生理盐水,其余各组大鼠注射胶原酶Ⅳ构建脑出血模型。造模后24h阳性药组大鼠给予七叶皂苷钠片12.5mg/kg灌胃,芪龙胶囊高、中、低剂量组大鼠给予芪龙胶囊375mg/kg、250mg/kg、125mg/kg灌胃,共3d。采用改良的神经功能缺损评分(m NSS)检测大鼠造模后1d、3d的神经功能缺损情况,干湿重法检测大鼠脑含水量变化,免疫荧光标记法检测脑组织中Iba1和NLRP3含量的表达情况,HE染色计算脑出血面积以及Western blot技术检测P2Biodegradation characteristicsX7R、NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β蛋白含量的变化。结果:1、芪龙胶囊在急性脑出血后24h进行干预可有效改善脑出血预后。神经功能评分结果显示:造模后1d,与假手术组相比,模型组(P<0.01)、预给药组(P<0.01)、6h给药组(P<0.01)、24h给药组(P<0.01)评分均升高;与模型组相比,各给药组之间的评分差异无统计学意义。造模后3d,与假手术组相比,模型组(P<0.01)、预给药组(P<0.05)、6h给药组(P<0.01)神经功能评分均升高;与模型组相比,24h给药组可降低神经功能评分(P<0.05)。与造模后1d相比,造模后3d预给药组(P<0.01)、6h给药组(P<0.05)、24h给药组(P<0.01)神经功能评分均有所下降。体质量变化计算结果显示:与假手术组相比,模型组(P<0.01)、预给药组(P<0.01)、6h给药组(P<0.05)大鼠体质量变化均增加;与模型组相比,24h给药组体质量变化降低(P<0.05)。脑出血体积计算结果显示:与模型组相比,24h给药组大鼠脑出血体积减少(P<0.05)。脑含水量结果表明,各给药组大鼠与模型组相比无显著性差异(P>0.05)。2、芪龙胶囊通过抑制P2X7R/NLEnasidenib临床试验RP3-IL-1β信号通路改善大鼠脑出血后的神经炎症反应。神经功能缺损评分结果显示:造模后1d,与假手术组相比,模型组(P<0.01)、阳性药组(P<0.01)、芪龙胶囊高剂量组(P<0.01)、中剂量组(P<0.01)、低剂量组(P<0.01)评分均升高。造模后3d,与假手术组相比,各给药组评分均升高(P<0.01);与模型组大鼠相比,芪龙胶囊中剂量组可显著降低神经功能评分(P<0.05)。与造模1d后相比,造模3d后阳性药组(P<0.01)、芪龙胶囊高剂量组(P<0.05)、中剂量组(P<0.01)、低剂量组(P<0.01)评分均降低。脑含水量结果显示,各给药组大鼠脑含水量与模型组相比无显著性差异(P>0.05)。HE染色结果显示:与模型组大鼠相比,芪龙胶囊中剂量组(P<0.01)、低剂量组(P<0.01)均可有效减少脑出血面积。利用免疫荧光标记脑出血周围组织中的Iba1结果显示:与假手术组相比,模型组(P<0.01)、阳性药组(P<0.01)、芪龙胶囊高剂量组(P<0.01)、中剂量组(P<0.05)、低剂量组(P<0.01)表达均升高;与模型组相比,阳性药组(P<0.01)、芪龙胶囊中剂量组(P<0.01)表达降低。免疫荧光标记脑出血周围组织中的NLRP3结果显示:与假手术组相比,模型组表达升高(P<0.05);与模型组相比,阳性药组(P<0.05)、芪龙胶囊中剂量组(P<0.01)表达降低。Western blot检测结果显示,与假手术组相比,模型组大鼠脑组织中P2X7R(P<0.01)、NLRP3(P<0.01)、ASC(P<0.01)、caspase-1(P<0.01)、IL-1β(P<0.01)蛋白含量明显增加,芪龙胶囊高剂量组P2X7R(P<0.01)、NLRP3(P<0.05)、ASC(P<0.01)、caspase-1(P<0.01),芪龙胶囊低剂量组P2X7R(P<0.01)、caspase-1(P<0.01)蛋白含量增加;与模型组相比,阳性药组大鼠脑组织中P2X7R、caspase-1蛋白含量降低(P<0.01),芪龙胶囊中剂量组大鼠脑组织中P2X7R(P<0.01)、NLRP3(P<0.05)、ASC(P<0.05)、caspase-1(P<0.05)、IL-1β(P<0.05)蛋白含量降低,芪龙胶囊低剂量组P2X7R(P<0.05)。结论:芪龙胶囊在急性脑出血后24h进行干预能有效BIBW2992作用改善脑出血预后的效果,可能是通过抑制P2X7R/NLRP3-IL-1β信号通路发挥抗炎作用的。