基于OPG-RANKL-RANK通路探讨鹿角胶治疗骨质疏松症的作用机制

目的:研究中药鹿角胶对骨质疏松症(OsteopoLung immunopathologyrosis,OP)小鼠骨吸收的干预作用,从破骨细胞(OsteoclPS-341化学结构ast,OC)角度证实鹿角胶的药效,从体内和体外实验探究鹿角胶对OP的作用机制。方法:体内实验:选取8周龄C57BL/6雌性小鼠,经数字随机表法将小鼠分为:SHAM(假手术)生理盐水组、SHAM鹿角胶组、OVX(去卵巢术)生理盐水组和OVX鹿角胶组,每组6只。连续给药4周后,采用HE染色、TRAP染色和Micro-CT测定小鼠股骨骨量的变化;ELISA测定小鼠血清中OPG和RANKL的浓度变化;Western Blot方法测定小鼠OPG和RANKL的蛋白表达。体外实验:选取8周龄SD雌性大鼠,经随机数字表法将大鼠空白血清组(Blank serum group,Bs)、鹿角胶含药血清组(DAG containing serum group,Ds),每组6只。鹿角胶给药7天后,制备胎牛血清、空白血清和鹿角胶含药血清,对破骨细胞进行培养,采用抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)测定空白血清和鹿角胶含药血清对破骨细胞活力的影响。结果:(1)中药干预4周后,小鼠股骨HE染色及Micro-CT结果显示,SHAM生理盐水组与OVX生理盐水组相比,OVX生理盐水组骨小梁稀少且窄,骨小梁间距加大,骨质疏松症动物造模成功。OVX鹿角胶组和OVX生理盐水组相比,OVX鹿角胶组骨小梁增粗且宽,显著增加BV/TV和Tb.N(P<0.01)。(2)OVX鹿角胶组和OVX生理盐水组相比,血清RANKL浓度下降和OPG浓度升高,RANKL蛋白表达下降和OPG蛋白表达升高(P<0.05)。Captisol研究购买(3)鹿角胶含药血清组与胎牛血清组、空白血清组相比,TRAP染色的破骨细胞数量和面积降低,破骨细胞活性受到抑制(P<0.05)。结论:实验数据表明,中药鹿角胶治疗骨质疏松症,通过抑制破骨细胞的活性,有效抑制破骨细胞的分化,同时能够促进骨量上升、骨小梁增粗,改善骨小梁结构,这可能是治疗骨质疏松症的重要方法之一。