研究背景:脓毒症是机体对感染的反应失调引起的可危及生命的器官功能障碍,在重症监护室的病死率居高不下,且通常预后不良。其中,脓毒症心肌损伤是主要的器官损伤,通常发生在疾病早期,可以严重影响疾病预后。目的:研究参附注射液对脓毒症心肌损伤大鼠的保护作用,并研究钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ、线粒体通透性转换孔在心肌保护过程中的变化,探讨其作用机制。方法:(1)脓毒症模型建立和分组:健康雄性SD大鼠(240±10 g)随机分为假手术组(Sham)、盲肠结扎穿孔术致脓毒症心肌损伤模型组(CLP)、低剂量参附注射液组(4ml/kg,LSF)、高剂量参附注射液组(10 ml/kg,HSF),每组16只。(2)脓毒症心肌损伤大鼠疾病严重程度:脓毒症评分判断严重程度;进行生存分析。(3)心脏功能观察:术后36小时超声心动图检查心功能;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清心肌肌钙蛋白I、脑利钠肽。(4)大鼠感染情况:术后36小时解剖观察腹腔感染情况;ELISA检测大鼠血清白介素6、白介素10、肿瘤坏死因子α。(5)心肌组织变化:术后36小时心脏组织HE染色观察脓毒症大鼠心肌损伤情况;(6)参附注射液调控线粒体通透性转换孔机制研究:ELISA检测大鼠心脏组织肌浆网钙ATP酶含量;蛋白免疫印迹法(WB)检测大鼠心脏组织Ca MKⅡ-δ、MCU表达情况;同时提取各组大鼠心肌线粒体,采用线粒体肿胀法检测心肌细胞线粒体通透性转换孔的开放程度。结果:(1)CLP组脓毒症评分比Sham组高(P<0.05),LSF组和HSF组分数较CLP组下降(P<0.05),且HSF组脓毒症评分更低(P<0.05)。Sham组大鼠术后36小时存活率为100%,与Sham组相比,CLP组存活率明显下降(P<0.05),HSF组相比CLP组存活率上升(P<0.05),LSH组相比CLP组存活率无显著变化(P>0.05)。(2)与Sham组进行比较,CLP组大鼠SV、LVEF都下降(P<0.05),LSF组和HSF组相较CLP组SV、LVEF升高(P<0.05)。各组大鼠术后36小时ELISA结果显示,CLP组、LSF组、HSF组大鼠血清BNP水平均高于假手术组(P<0.05),但是LSF组、HSF组大鼠血清BNP水平均低于CLP组(P<0.05PF-03084014作用),HSF组血清BNP水平低于LSF组(P<0.05)。相较Sham组,CLP组血清c Tn I升高(P<0.05),HSF组较CLP组c Tn I下降(P<0.05)。心脏组织HE染色结果显示,ShamBio-based biodegradable plastics组大鼠心肌纤维排列E7080体内紧密且规则,细胞形态正常且结构清晰;CLP组大鼠心肌纤维排列紊乱、甚至中断,心肌细胞水肿,可见炎性细胞渗出;LSF组与HSF组大鼠心肌纤维排列稍紊乱,炎性细胞渗出减少,细胞水肿较CLP组减轻。(3)CLP组、LSF组、HSF组大鼠血清IL-6水平均高于假手术组(P<0.05),IL-10低于假手术组(P<0.05);LSF组、HSF组大鼠血清IL-6水平均低于CLP组(P<0.05),IL-10高于CLP组(P<0.05)。相较Sham组,CLP组血清TNF-α升高(P<0.05),HSF组较CLP组指标下降(P<0.05),HSF组血清TNF-α水平低于LSF组(P<0.05)。(4)与Sham组进行比较,CLP组大鼠肌浆网钙ATP酶(SERCA)含量下降(P<0.05)。与CLP组进行比较,LSF组和HSF组大鼠SERCA含量均上升(P<0.05)。Western blot结果显示,与Sham组相比较,CLP组大鼠Ca MKⅡ-δ表达增加(P<0.05);LSF组、HSF组较CLP组Ca MKⅡ-δ表达量降低(P<0.05),且HSF组较LSF组改善更明显(P<0.05)。与Sham组相比较,CLP组、LSH组和HSF组线粒体钙单向转运体(MCU)表达量均升高(P<0.05),LSH组和HSF组MCU表达量相比CLP组无显著改变(P>0.05)。结论:参附注射液可以改善脓毒症心肌损伤,其机制可能与抑制Ca MKⅡ的表达、调节MPTP的异常开放有关。