研究背景与目的:心脏纤维化是指各种原因所致的细胞外基质(extra cellular matrix,ECM)成分在心脏的过度产生和沉积导致心脏发生严重的瘢痕化、组织僵硬和功能受损。体外研究已经证明血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)可以增Regorafenib说明书加成纤维细胞的活化和增殖,而近年来研究发现作为PI3K/Akt信号通路介导的效应物,赖氨酸特异性脱甲基酶5A(KDM5A)KDM5A基因和心力衰竭、先天性心脏病和致心律失常性右心室心肌病相关,而血管紧张素Ⅱ又KDM5A之间存在着何种联系目前尚未研究清楚,如果可以证实KDM5A在心脏纤维化过程中的表达机制,又可以为我们心脏纤维化的治疗提供一个新的治疗靶点。本研究旨在通过生物信息学分析探讨KDM5A在心脏纤维化中的作用。方法:本研究为进一步研究KDM5A在心脏纤维化中的作用实验分为以下Azo dye remediation部分:(1)将从10名DCM(扩张性心脏病)患者获得的心肌组织中,四个心室样本用于细胞培养。使用六个样本来验证生物信息学分析的结果。左心耳(LAA)作为对照样本,是在之前的瓣膜置换手术中获得的。(2)在培养的CFs(心脏成纤维细胞)中分别加入不同浓度的血管紧张素Ⅱ,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8,美国)来评估细胞活性。Western blotting证实KDM5A通过PI3k/Akt信号通路受Ang Ⅱ调节。(3)通过转录组学分析差异表达基因(DEG)。对模块中的关键基因进行了基因本体论(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:CCK-8分析结果表面在1×10-7 mol/L的浓度下,24小时和48小时的细胞增殖能力分别显著较高。因此,本研究采用了该浓度(1×10-7 mol/L)selleck抑制剂,Western blotting结果显示,经LY294002(PI3K抑制剂)处理的24小时后没有观察到PI3K总蛋白水平的变化,但磷酸化的PI3K的表达水平有明显降低。同样的,磷酸化Akt表达水平显著降低,可以看到经Ang Ⅱ处理的CFs可诱导KDM5A的稳定增加,这些结果都表明了Ang Ⅱ通过PI3K/Akt信号通路上调KDM5A的表达。生物信息学分析表明KDM5A调控的DEG主要富集于PI3K-Akt信号通路、局灶性粘附、蛋白质代谢途径等。结论:Ang Ⅱ/PI3K/Akt/KDM5A轴明确参与心脏重塑的调节。这项研究为进一步研究心脏纤维化的分子机制、生物标志物和治疗提供了新的见解。