本研究皆在探究苗药“四大血”(Sidaxue, SX)调控类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)中细胞自噬的分子机制。首先，构建胶原诱导型关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)大鼠模型，SX给药21 d后计算大鼠胸腺指数和脾脏指数，观察大鼠膝关节滑膜组织病理改变，并检测大鼠血清白细胞介素-6(intervirus infectionleukin-6, IL-6)和白细胞介素-37(interleukin-37, IL-37)水平。进一步利用网络药理学分析SX调控RA中细胞自噬的可能分子机制，并借助Autodock vina软件进行分子对接验证，同时通过在线数据库预测SX主要活性成分的药学性质，结合分子对接评分初筛效应成分。最后，利用RT-qP此网站CR和Western blot分别检测SX对CIA大鼠滑膜组织中磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide-3 kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)及微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)mRNA和蛋白表达的影响。动物实验结果表明，SX能有效缓解CIA大鼠关节肿胀，缓解免疫器官的过度反应，改善滑膜组织病理改变，降低炎症因子IL-6、IL-37水平(P<0.05)。网络药理学结果表明，AKT1、CASP3、BCL2L1等靶点较为关键，动物自噬、凋亡及PI3K/AKT信号通路等途径与RA相关且www.selleck.cn/products/imidazole-ketone-erastin显著性较高，分子对接结果显示PI3K/AKT信号通路关键靶点与SX主要活性成分稳定结合，β-谷甾醇、卡亚宁、乌索酸和胡萝卜苷可能是SX调控自噬的较优效应成分。RT-qPCR和Western blot实验结果显示，SX呈剂量依赖性下调PI3K、AKT、mTOR mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.001)的表达，上调自噬标志物LC3 mRNA表达水平(P<0.05),促进LC3-Ⅰ转变为LC3-Ⅱ(P<0.01)。综上所述，SX具有改善RA的作用，其机制可能是抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路，进而促进滑膜细胞发生自噬性细胞死亡以拮抗滑膜细胞的异常增殖。