目的:建立、评估Helicobacter hepaticus基于等位基因特异性(Allelic Special,AS)引物和Taqman荧光探针的ADRB1、CYP2D6、CYP3A5和NPPA多重基因分型体系,以用于β肾上腺素受体阻滞剂、钙离子拮抗剂和利尿剂等抗高血压药物的伴随诊断。方法:建立ADRB1、CYP2D6、CYP3A5和NPPA的基因分型多重检测体系,研究内容包括:(1)针对四种基因的野生型和突变型基因设计错配前向AS引物、共用后引物与荧光探针;(2)以多重野生检测体系和多重突变检测体系中扩增循环数之差(ΔCq)判读基因分型结果,通过单重qPCR体系检测标准质粒和人基因组DNA进行错配AS引物筛选,并进一步探索构建多重qPCR体系;(3)设计测序引物,对NGS、Sanger测序与多重qPCR的检测结果进行方法学一致Navitoclax性对比,验证基因分型结果的准确性;(4)评估临床前性能,包括检测范围、不精密度、交叉反应、干扰试验及稳定性。结果:ADRB1、CYP2D6、CYP3A5和NPPA单核苷酸多态性(SNP)基因分型引物特异性良好。基于引物筛选的多重qPCR体系基因分型准确,与NGS和Sanger测序结果一致,无统计学差异。多重qPCR检测体系检测范围在1.25 ng-40 ng,批间精密度≤5%,批JNJ-42756493内精密度≤5%。同时,未观察到显著的交叉反应,检测结果不受同源基因和口腔内含物的干扰,稳定性评估符合要求。结论:课题构建的多重qPCR方法简捷、结果准确且低成本,能通过基因分型ADRB1、CYP2D6、CYP3A5和NPPA,以期为高血压患者合理服用β肾上腺素受体阻断剂、钙离子拮抗剂和利尿剂等相关药物提供指导,避免因错误用药和过量用药而导致的机体损伤。