目的:研究地肤子皂苷对M5诱导HaCaT细胞炎症及增殖的作用,探讨地肤子治疗银屑病的可能机制。方法:(1)MTT实验检测地肤子皂苷对HaCaT细胞活力的影响,并预选地肤子皂苷最佳作用浓度、时间。(2)M5(IL-17A、IL-22、oncostatin M、IL-1α、和TNF-α)细胞因子培养HaCaT细胞,模拟银屑病细胞体内环境,体外建造银屑病细胞模型。(3)CCK-8实验检测银屑病细胞模型的构建效果,以及地肤子Erastin MW皂苷对银屑病细胞模型的细胞活力影响。(4)Wb实验检测地肤子皂苷对银屑病细胞模型中β-Catenin、c-Myc、VEGF蛋白表达的影响。(5)ELISA、qPCR实验检测地肤子皂苷对银屑病细胞模型中IL-1β、IL-8、IL-18、IL-6的分泌及mRNA表达水平的作用。(6)Wb实验检测地肤子皂苷对银屑病细胞模型中TLR4、NF-κB p65蛋白表达的影响。结果:(1)基于MTT实验结果,相较于Control组,24h时,5、10、25、50和100 μmol/L地肤子皂苷处理后的HaCaT细胞,其活力显著降低,细胞生长48h后,50、100 μmol/L地肤子皂苷抑制HaCaT细胞增殖效果减弱,差异具有统计学意义。(2)基于CCK-8实验及倒置显微镜结果,72h时,相较于Control组,M5组细胞活力更高,Momordin Ic组细胞活力更低,相较于M5组,M5+Momordin Ic组细胞活力更低,差异具有统计学意义。(3)基于Wb实验结果,相较于Control组,M5组中β-catenin、c-Myc和VEGF的蛋白表达增加,Momordin Ic组中β-catenin、c-Myc和VEGF蛋白表达下降;相较于M5组,M5+Momordin此网站 Ic组中β-catenin、c-Myc和VEGF蛋白表达下降,差异具有统计学意义。(4)基于ELISA、qPCR实验结果,相较于Control组,M5组中IL-1β、IL-8、IL-18和IL-6 mRNA表达及分泌上升,Momordin Ic组中IL-1β、IL-8、IL-18和IL-6 mRNA表达及分泌下降,相较于M5组,M5+Momordin Ic组中IL-1β、IL-8、IL-18和IL-6 mRNA表达及分泌下降,差异具有统计学意义。(5)基于Wb实验结果,相对于Control组,M5组TLR4、NF-κB p65表达显著上调,Momordin Ic组TLR4、NF-κB p65表达显著降低,相较于M5组,biocontrol agentM5+Momordin Ic组中TLR4、NF-κB p65表达显著降低,差异具有统计学意义。结论:HaCaT细胞在M5细胞因子诱导下,炎症及增殖状态均被上调。地肤子皂苷可能通过作用于TLR4介导的NF-κB通路的激活作用于下游炎症因子靶基因以减轻银屑病的炎症反应、抑制wnt/β-actenin通路降低细胞活力治疗银屑病。