咪达唑仑调节YAP/TAZ信号通路对骨肉瘤细胞增殖凋亡和侵袭的影响

目的:探究咪达唑仑(MDZ)调节Yes相关蛋白(YAP)/PDZ结合基序转录共激活因子(TAZ)信号通路对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:qRT-PCR、Western blot检测人正常成骨细胞系、OS细胞系YAP、TAZ mRNA和蛋白的表达,筛选最佳干预细胞系;以不同浓度的MDZ(0、12.5、25、50、100、200μmoL/L)干预OS细胞,MTT法检测细胞增殖活性,筛选最佳干预浓度;将OS细胞随机分成control组、MDZ组、pcDNA3.1组、pcDNA3.1-YAP/TAZ组,qRT-PCR法检测转染效率;EdU染色、流式细胞仪和Transwell小室分别检测细胞增殖、凋亡和侵袭;Western bloMedical physicst方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及YAP、TAZ蛋白表获悉更多达;构建OS裸鼠模型,分为对照组和MDZ组,免疫组化法检测移植瘤组织Ki-67、YAP、TAZ蛋白表达,TUNEL染色检测凋亡。结果:OS细胞系中YAP、TAZ mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05);MDZ显著降低PCNA、N-cadherin、YAP、TAZ表达,抑制MG63、U20S细胞增殖和侵袭,Decitabine升高Bax、E-cadherin表达,促进细胞凋亡。过表达YAP/TAZ可逆转MDZ对MG63、U20S细胞增殖和侵袭的抑制作用,对MG63、U20S细胞凋亡的促进作用(P<0.05);体内实验表明,MDZ显著降低移植瘤质量、体积及Ki-67、YAP、TAZ表达水平,促进移植瘤细胞凋亡(P<0.05)。结论:MDZ可能通过抑制YAP/TAZ信号通路,抑制OS细胞增殖和侵袭,促进凋亡。