目的 构建人胆囊类器官的培养体系，Chinese herb medicines实现人胆囊类器官体外稳定快速扩增，并鉴定其特性。方法 分离人来源胆囊组织上皮细胞，运用三维培养体系将细胞嵌入基质胶中进行3D培养。观察胆囊类器官生长过程中球囊样结构的面积、周长与形态，计算形状因子。利用细胞免疫荧光染色技术检测胆囊类器官的干性标志物CD133、富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(LGR5)以及胆管上皮细胞标志物肝RAD001体内细胞核因子1β(HNF1β)、上皮细胞黏附分子（Ep CAM）、细胞角蛋白7、细胞角蛋白19、性别决定区Y框9(SOX9)的表达情况。使用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brd U）摄入实验检测小分子CHIR-99021和blebbistatin对类器官增殖特性的影响。结果 胆囊类器官在体外培养过程中，类器官形成的球囊面积逐渐增大selleck，第7天的类器官面积与第1天比较差异有统计学意义（P<0.01），第7天时其形状因子从第1天的0.80(0.75,0.84)增高至0.83(0.81,0.85)(P<0.01)，表明类器官在体外稳定生长且形状逐渐趋于一个完美的圆。免疫荧光染色可见类器官表达胆管上皮细胞标志物。在培养基中加入小分子CHIR-99021和blebbistatin后，Brd U检测显示类器官的增殖能力增强（P<0.01）。结论 在体外成功培养获得了具有增殖能力的人胆囊类器官，其具有胆管上皮细胞的特性，可用于胆管疾病的研究与建模。