云南黑松露醇提物对小鼠T淋巴细胞免疫调节作用

目的观察云南黑松露醇提物对小鼠T淋巴细胞增殖及免疫功能的影响。方法将干燥云南黑松露粉末进行乙醇超声提取、乙酸乙酯萃取,水相及乙酸乙酯相部分样品分别采用C_(18)反相柱、凝胶柱进行分离、PLX3397浓缩;噻唑蓝(MTT)法检测云南黑松露醇提物对刀豆蛋白A(ConA)刺激小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测云南黑松露醇提物对Anti-CD3刺激小鼠脾淋巴细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素2(IL-2)的影响;蛋白印迹(Western blotting)法检测云南黑松露醇提物对小鼠脾淋巴细胞IFN-γ表达水平的影响;流式细胞术检测云南黑松露醇提物对小鼠脾淋巴细胞CD_3~+及CD_4~+细胞表达水平的影响。结果云南黑松露醇提物共分离得到组分17个。其中水相部分分离得到组分8个,记作1-8;乙酸乙酯相部分分离得到组分9个,记作A-I。MTT结果显示,在ConA诱导下,F号组分对小鼠脾淋巴细胞具有一定促增殖活性。ELISA结果显示,在Anti-CD3诱导下,1、F和G号组分可促进小鼠脾淋巴细胞IL-2和IFN-γ分泌。Western bloPLX4032tting结果显示,2、F和G号组分可提高小鼠脾淋巴细胞IFN-γ表达水平。流式细胞术检测结果显示,G号组分可促进小鼠脾淋巴细胞CD_3~+T细胞表达,1和2号组分可促进小鼠脾淋巴细胞CD_4~+T细胞表达。结论云南黑松露醇提物具有促进小鼠脾淋巴细胞增殖的活性成分,可激活T细胞分泌炎症因子IFN-γ和IL-2,提高IFN-γ及CD_3~+、CD_4~+细胞oxidative ethanol biotransformation表达,具有一定免疫调节活性。