二氢杨梅素/α-乳白蛋白复合物的制备、表征及其应用

二氢杨梅素(DMY)是藤茶中的主要类黄酮,具有多种生物活性,可用于医药、食品等领域。但DMY稳定性和生物利用度较差,导致其在食品工业的广泛应用受限。α-乳白蛋白bloodstream infection(α-La)是一种安全的功能性食源蛋白质,可与活性分子互作形成复合物,从而改善活性分子的稳定性和生物利用度。至今尚无DMY与α-La互作的系统研究。有鉴于此,本研究以天然低共熔溶剂(NADES)为溶剂,配合超声辅助提取技术,从藤茶中提取类黄酮,评价其抗肿瘤活性。同时制备了DMY/α-La的共价/非共价复合物,研究了复合物的结构和活性,构建了基于相关复合物的纳米乳液体系,评价了纳米乳液的稳定性及对β-胡萝卜素保护效果。本研究的结果对推动DMY和α-La在食品中的应用具有重要意义。本论文主要研究内容和相关结论如下:(1)采用超声辅助NADES提取技术,从藤茶中绿色高效地制备类黄酮提取物,并对其抗氧化和抗癌细胞增殖活性进行考察。结果表明由摩尔比为4:1、含水量为20%的氯化胆碱和葡萄糖组成的低共熔溶剂为最适提取溶剂。最佳提取条件为液固比30 m L/g、超声功率490 W、超声时间6.5 min。类黄酮得率为83.93%,与预测得率接近。此外,在提取液中加入等体积的磷酸盐缓冲液(100 mmol/L,p H7.0),可有效回收类黄酮(回收率,86.75%)。虽然该提取物的化学抗氧化活性略低于DMY,但能通过诱导细胞凋亡、延缓细胞周期、改变线粒体膜电位、清除细胞内活性氧等方式有效抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖。(2)基于荧光光谱法和分子对接法系统地揭示DMY与α-La间https://www.selleck.cn/products/ABT-263.html的非共价互作,并以二者复合物做为乳化剂构建纳米乳KD025液。结果表明DMY与α-La可形成非共价复合物,导致α-La荧光静态淬灭,二者的结合受氢键和范德华力驱动,并且复合导致α-La的色氨酸和酪氨酸残基周围的微环境发生了变化,这与分子对接结果相吻合。此外,复合物中DMY比例的增加可逐步提高复合物降低油/水界面张力效果,和其ABTS自由基清除能力。该复合物形成的纳米乳液的稳定性和保护β-胡萝卜素效果均优于α-La稳定的纳米乳液,且其表现与复合物中的DMY含量呈正相关。(3)通过碱诱导的方法,制备α-La/DMY共价复合物,表征其结构,测定其抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性,以其为乳化剂构建纳米乳液。紫外和红外光谱证明了该复合物的形成,制备过程中的DMY添加量与其总酚含量正相关。该复合物具有突出的ABTS自由基清除能力、还原力和α-葡萄糖苷酶抑制活性,且与其总酚含量正相关。该复合物可作为乳化剂稳定纳米乳液。所得乳液的稳定性和保护β-胡萝卜素的效果与总酚含量正相关,均优于α-La构建的纳米乳液。