丙硫菌唑是一种新型的三唑硫酮类杀菌剂,可以用于防治多种谷类作物病害,对几乎所有麦类病害都有很好的防治效果。然而,丙硫菌唑药剂的不科学使用,造成丙硫菌唑及其代谢物脱硫Navitoclax NMR丙硫菌唑残留危害环境安全和农产品质量安全,并对施药人员暴露风险显著。当前,丙硫菌唑及其代谢物的残留分析方法主要是仪器分析方法,该类方法具有灵敏度高、准确度好、结果可信度高等特点,但存在前处理复杂、设备昂贵、不适合现场快速检测等不足。因此,本研究通过人工合成丙硫菌唑人工抗原,免疫大白兔筛选获得抗丙硫菌唑多克隆抗体,建立了农产品和环境样品Liproxstatin-1抑制剂中丙硫菌唑酶联免疫吸附分析方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和化学发光酶免疫分析方法(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA),研究结果为保障环境安全和农产品质量安全提供了良好的技术支撑。主要研究内容如下:1.抗丙硫菌唑多克隆抗体的筛选与鉴定以丙硫菌唑原药与3-溴丙酸甲酯反应合成丙硫菌唑半抗原,通过核磁共振鉴定为目标半抗原。将丙硫菌唑半抗原与鸡卵清蛋白(OVA)和牛血清蛋白(BSA)偶联,制备包被抗原和免疫抗原。偶联后的人工抗原经紫外光谱分析,证明偶联成功,通过计算,包被抗原和免疫抗原的偶联比分别为31:1和34:1。用偶联成功的免疫原免疫新西兰大白兔,通过五次免疫,大白兔血清效价达到1:512000。选取竞争结果较好的一只新西兰大白兔,采集心脏血,用辛酸-硫酸铵法纯化血清,得到抗丙硫菌唑多克隆抗体。用间接竞争ELISA(ic-ELISA)方法测定多克隆抗体与丙硫菌唑的结合性,IC_(50)为0.27μg/m L。经过交叉反应测定,该抗丙硫菌唑多克隆抗体对除脱硫丙硫菌唑外的其他六种丙硫菌唑类似物交叉反应率均不小于等于0.1%。2.丙硫菌唑残留ELISA方法的建立将得到的丙硫菌唑人工抗原和抗丙硫菌唑多克隆抗体用于丙硫菌唑残留ELISA方法的建立,通过优化抗原、抗体工作浓度,工作缓冲液中甲醇含量、钠离子浓度、p H值,建立了农产品和环境样品中ELISA分析方法。研究结果表明,在抗原浓度为0.8625 mg/L、抗体浓度为0.1606 mg/L时,该ELISA方法的IC_(50)为102.3 ng/m L,检出限为10.7 ng/m L,建立的方法除对脱硫丙硫菌唑有68.0%的交叉反应外,与其他六种丙硫菌唑类似物没有明显的交叉反应(≤0.1%)。在7.5μg/g-30μg/g添加浓度下,丙硫菌唑在小麦籽粒和地表水中的添加回收率范围为81.9%-104.7%,相对标准偏差(RSD)为1.5%-5.6%。与UPLC-MS/MS检测结果比较,结果显示线性回归方程为y=1.158x-4.294,决定系数为0.99,表明建立的ELISA方法与UPLC结果具有良好的一致性。3.丙硫菌唑残留CLEIA方法的建立在最佳化学发光底物配比基础上,通过优化抗原、抗体工作浓度,工作缓冲液中甲醇含量、钠离子含量、p H值,建立了丙硫菌唑残留CLEIA方法。结果表明,在抗原浓度为0.22 mg/L、抗体浓度为0.32 mg/L时,该CLEIA方法的IC_(50)为38.0 ng/m L,检出限为1.2 ng/m L,建立的方法除对脱硫丙硫菌唑有40.4%的交叉反应外,与其他六gut infection种丙硫菌唑类似物没有明显的交叉反应(<0.1%)。以大豆和地表水为对象开展添加回收实验,在100 ng/g-500 ng/g添加浓度下,添加回收率范围为89.5%-118.4%,RSD为2.0%-11.9%。与UPLC-MS/MS检测结比较,结果显示线性回归方程为y=0.855x+44.545,决定系数为0.938,表明建立的CLEIA方法与UPLC结果具有良好的一致性。与ELISA方法相比,该方法检测灵敏度提升接近3倍。本研究成功合成了丙硫菌唑人工抗原,用其免疫新西兰大白兔后筛选获得了抗丙硫菌唑多克隆抗体,用获得的多克隆抗体建立了农产品和环境样品中丙硫菌唑残留ELISA方法和CLEIA方法,获得的抗体特异性较好,使用该抗体建立的两种丙硫菌唑残留免疫分析方法具有处理简单、成本低廉、灵敏度高、环境友好等优点,能够满足农产品和环境样品中丙硫菌唑残留检测,符合现行丙硫菌唑最大残留限量要求。