目的:为了有效选择粪菌移植的保护剂,本研究对初筛后的粪菌移植中的保护剂进行了一个系统评价。方法:不同配方的保护剂进行初筛,先对含有10种不同配方保护剂的供体菌群在冷冻制备和冻干制备后并储存1个月时运用平板计数方法进行活菌检测。接着,含有初筛后的不同配方保护剂的供体菌群在冷冻制备和冻干制备后并储存2个月时,运用平板计数、CCLaduviglusib供应商K8、细菌死活染色后流式细胞检测及荧光强度检测技术等方法进行体外活菌检测。另外,在不同的制备条件下,将含有初筛后的不同配方保护剂的供体菌群移植到抗生素处理后的SPF级小鼠中,每组3只,共5组,移植后第14天的收集粪便进行宏基因组测序以观察在受体小鼠体内菌群定植情况。结果:(1)初筛的实验结果表明:5%海藻糖保护剂肠道菌群存活率(F2组85.33%,FD2组85.65%)和5%蔗糖+5%菊粉+1%半胱氨酸盐酸盐复合保护剂组肠道菌群存活率(F3组84.65%,FD3组84.45%)粪菌液样品中的细菌存活率高于无保护剂组肠道菌群存活率(F0组30.50%,FD0组28.33%),并且Hospital infection比其他组的保护剂存活率稍高,则从初筛的结果中筛选出最有潜力的两种保护剂分别是5%海藻糖保护剂和5%蔗糖+5%菊粉+1%半胱氨酸盐酸盐复合保护剂;(2)初筛后的保护剂进行多种活菌检测方法均得到同一个相似的结果趋势:在不同条件的粪菌移植样品制备中,含有5%海藻糖保护剂(T)和5%蔗糖+5%菊粉+1%半胱氨酸盐酸盐复合保护剂(SI)的肠道菌群存活性均显著高于未含有保护剂的肠道菌群活性(P<0.05),并且保护细菌活性的能力与10%甘油保护剂效果相当,并且SI比T有更能保护厌氧LXH254体内实验剂量菌的趋势。(3)对含有初筛后的供体菌群的保护剂进行移植到受体小鼠体内,受体小鼠内的肠道菌群α多样性、PCOA、与供体菌群的相关性分析(F2A和L2A的Pearson相关系数分别为0.75和0.78)以及菌群构成的结果均显示所有含有保护剂的供体菌群均可有效在受体小鼠体内定植,并且含有SI保护剂的供体肠道菌群在受体小鼠体内菌群定植效果更佳。初筛后不同配方的保护剂对受体小鼠体内定植后的益生菌菌株的保护能力具有物种特异性,以及对受体小鼠体内菌群代谢功能保护能力的同样具有特异性。结论:(1)在众多的粪菌移植保护剂的初筛中,5%海藻糖保护剂(T)与5%蔗糖+5%菊粉+1%半胱氨酸盐酸盐复合保护剂(SI)最具有活性潜力。(2)初筛后的不同配方保护剂基于肠道菌群体外活性检测以及移植到小鼠体内后定植的分析这2方面进行了一个系统评价。在进行冷冻或冻干粪菌移植样品制备时相比于5%海藻糖保护剂(T),5%蔗糖+5%菊粉+1%半胱氨酸盐酸盐复合保护剂(SI)既可以更好保护肠道中厌氧菌活性又能有效促进供体肠道菌群在受体小鼠体内菌群有效定植,亦有潜力提高粪菌移植产品的最终疗效,有利于粪菌移植疾病治疗作用的发挥,其实验结果可在粪菌移植样品制备中的保护剂选择起到一个参考作用。