三重PCR和双重荧光探针法检测ALV-A/J亚群方法的建立与应用

IACS-010759小鼠为快速检测禽白血病病毒（avian leukemia virus,ALV）并同时鉴别A亚群（ALV-A）和J亚群（ALV-J），根据ALV不同亚群基因设计特异性引物和Taq Man荧光探针，经优化反应条件，建立通用型、A亚群与J亚群三重PCR以及A亚群与J亚群双重荧光探针检测方法。结果显示：三重PCR检测方法能特异性扩增ALV所有亚群以及A亚群和J亚群，检测灵敏度达1×103拷贝/μL；建立的ALV-A/J双重荧光探针检测方法特异性强，可检测的最低拷贝浓度为40拷贝/μL。本研究建立的三重PCR方法与商品化ALV实时荧光PCR检测试剂盒均有较高的符合率（Kappa系数> 0.75）；针对24份发病鸡精液，ALV-A/J双重荧光探针检测方法与商品化ALV实时荧光PCR检测试剂盒检测结果一致；本研究建立的两种检测方法均能同时鉴www.selleck.cn/products/Gemcitabine-Hydrochloride(Gemzar)别出ALV A亚群和J亚群。利Autoimmune vasculopathy用本研究建立方法对安徽省394份临床样本进行检测，发现ALV总阳性率为38.58%，以J亚群单一感染为主，同时伴有A亚群单一感染以及A/J亚群混合感染。结果表明，本研究建立的ALV-通用型/A亚群/J亚群三重PCR方法和ALV-A/J亚群双重荧光探针检测方法特异性强，检测快速，具有临床样本检测的应用潜力，为临床上快速诊断及有效防控ALV感染及鉴别A/J亚群的单一或混合感染提供了技术支持。