基于NF-κB炎症通路探讨阔叶十大功劳对DSS诱导的小鼠急性UC的作用及机制

目的:观察阔叶十大功劳对溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠炎症反应的影响,并从NF-κB信号通路初步探讨其作用机制。方法:48只C57BL/6J小鼠,随机分为正常组、模型组、阔叶十大功劳低剂量组(2.3g/kg)、阔叶十大功劳中剂量组(4.6g/kg)、阔叶十大功劳高剂量组(9.2g/kg)、美沙拉嗪组(0.2g/kg),每组8只。正常组每日自由饮水,其余各组均自由饮用2.5%葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate sodium,DSS)建立UC小鼠模型,造模与灌胃同时进行,连续10日。期间每日记录小鼠体质量变化与疾病活动指数(Disease activity index,DAI)评分。实验结束后,颈椎脱臼处死小鼠,观察并记录结肠长度,苏木素-伊红(HE)染色法观测结肠组织病理状态,Western blotting检测结肠组织中紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin、ZO-1的水平,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测结肠组织中炎症因子TNF-α、IL-10、IL-1β及IL-6的水平,WesterIACS-10759 NMRn blotting法检测结肠组织胞浆和胞核中NF-κB蛋白水平。结果:与正常组相比,模型组小鼠体质量明显下降、疾病活动指数(DAI)评分显著增高、结肠长度明显缩短(P<0.01),结肠组织病理损伤显著,病理评分显著增高(P<0alternate Mediterranean Diet score.01),结肠组织中紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin、ZO-1水平显著下降(P<0.01),结肠组织中促炎因子IL-1β、IL-6及TNF-α水平明显升高、抑炎因子IL-10水平显著降低(P<0.01),结肠组织胞浆中NF-κB蛋白水平明显减少、胞核中NF-κB蛋白水平显著增加(P<0LY294002 MW.01)。与模型组比,阔叶十大功劳中高剂量组和美沙拉嗪组小鼠体质量显著增加、DAI评分显著下降、结肠长度显著增加(P<0.05,P<0.01),结肠病理损伤显著改善,中高剂量组病理评分明显下降(P<0.05,P<0.01),阔叶十大功劳中高剂量组结肠组织中紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin、ZO-1蛋白水平显著升高(P<0.05,P<0.01),结肠组织中促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显降低、抑炎因子IL-10水平显著升高(P<0.05,P<0.01),阔叶十大功劳中高剂量组结肠组织胞浆中NF-κB蛋白水平显著升高、胞核中NF-κB蛋白水平明显下降(P<0.05,P<0.01)。结论:阔叶十大功劳可改善由DSS诱发的UC小鼠结肠组织炎症反应,改善小鼠结肠上皮黏膜屏障功能,维持紧密连接的完整性,保护肠道黏膜,其机制可能与调控NF-κB信号通路有关。